靈芝母種培養基中各種浸出液如何製備

時間 2021-05-07 19:59:16

1樓:中國農業出版社

(1)馬鈴薯

是製備培養基常用的材料,應先去皮;發芽的薯塊芽眼處含有有毒的龍葵鹼,應挖去芽眼,切塊洗淨後稱重,加水煮沸,一般半小時,應軟而不爛,用預先浸溼的8層紗布過濾,方可使用。

(2)甘薯

也常用做培養基,其製作方法與馬鈴薯相同。但應選擇完好無病的薯塊作培養。甘薯塊根在貯藏期間,其傷口處最容易感染黑斑病,用病薯作培養基,雖挖去病斑,高壓滅菌後也很難殺厚垣孢子,會引起培養基真菌性汙染。

(3)木材及其他

作培養基應選擇幼嫩枝條或邊材,切成小塊或粉碎後稱重;植物塊莖、根莖作培養基時先在清水中洗淨,削去外皮後稱重,加適量的水煮沸10~15分鐘。

(4)穀物種子

洗淨後應先浸泡,然後煮沸1~2小時,趁熱用雙層紗布過濾,補充水量後即為浸出液。

(5)麥芽汁的製備

取大麥芽1000克,加水3000毫升,在60℃下保溫糖化。取糖化液0.5毫升加碘液2滴,無藍色反應即表示糖化完成。

為使麥芽汁澄清,可加入2~3個雞蛋的蛋清。拌勻後煮沸,蛋白質凝固後,過濾加水稀釋到1.1克/毫升,即為澄清麥芽汁。

(6)酵母汁的製備

取乾酵母7~10克,加水1000毫升,煮沸靜置,上清液過濾後即為酵母汁,每升用10毫升。

如何製作靈芝母種培養基?

2樓:中國農業出版社

(1)稱取

接配方精確稱取各種營養物質。

(2)製備

馬鈴薯等塊莖、植物根去皮後切塊洗淨,加水1000毫升,文火煮沸30分鐘後過濾取汁;玉米粉稱重後加水1000毫升,加熱到70℃左右,保持60分鐘,過濾取汁;麥芽稱重後加水1000毫升,加熱至60℃左右,保持60分鐘,過濾取汁,最後補足水量至1000毫升。

(3)酸鹼度調整

靈芝一般要求ph5.5~6,用稀鹼1摩爾/升naoh、稀酸1摩爾/升hcl來調整酸鹼度至適度為止。

(4)分裝、滅菌存放

將稱好的瓊脂,加入上述配好的液體培養基中,邊加熱邊攪拌,待瓊脂完全熔化後,用溼紗布迅速過濾,趁熱進行分裝。分裝前要備好容器,分裝試管時,要用玻璃漏斗進行分裝,儘量避免培養基黏附管口,如培養基不慎黏著管口或管壁,要用紗布擦淨,以免培養基粘住棉塞而引起汙染。試管裝量視需要而定,斜面培養基,裝量為試管長度的1/5或1/4;深層培養基,一般為試管長度的1/2或2/3。

培養基分裝好後均要加上棉塞。棉塞用普通棉花製作,不宜使用脫脂棉。棉塞的大小,鬆緊要與試管口的口徑相稱,塞入試管的棉塞要緊貼管壁,不留縫隙,鬆緊度以提起棉塞而試管不脫落,拔出棉塞有輕微的聲音為適宜。

標準的棉塞應是塞頭略大,不易變形,入管的部分佔塞總長的2/3,外露1/3為宜;然後把2~3只試管捆紮在一起,棉塞外包紮牛皮紙或舊報紙。再用油紙包紮,裝入高壓滅菌鍋滅菌,裝鍋時試管均要豎放,切勿傾斜或平置。蒸汽壓力1.

2千克/釐米2,溫度達121℃,保持30分鐘。滅菌後,讓其壓力和溫度自然下降之後,取出培養基按要求擺成斜面,斜面的長度以不超過試管的1/2為宜,培養基冷卻凝固,即成斜面培養基。放在25~28℃條件下,空白培養1~2天,檢查無汙染,才能使用。

靈芝培養基的種類有哪些?

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靈芝培養基按其營養成分、形狀或用途可分多種型別。通常按物理性狀、營養物質兩方面分類。

(1)根據物理性狀分類

根據靈芝培養基製成後的物理狀態,將其分為液體培養基、半固體培養基和固體培養基。

①靈芝液體培養基。根據靈芝所需的營養成分,按一定的配比混合而成的營養液。適用於靈芝菌種生產和菌絲體生產。

②靈芝半固體培養基。液體培養基中加少量瓊脂(0.2%~0.5%)或一定量的玉米粉、麩皮等,使之成為半固體狀態,稱為半固體培養基。適用於靈芝菌種的分離、培養和保藏母種。

③靈芝固體培養基。在液體培養基中,加入適量的凝固劑即可製成固體培養基。常用的凝固劑有瓊脂、明膠、矽膠等。

一般多用瓊脂,瓊脂的新增量根據季節不同而有所不同,冬天1.5%~2.0%,夏天2.

0%~2.5%,超過2.5%,培養基易開裂,影響菌絲生長。

適用於菌種的分離、培養和保藏原種用。另外,在靈芝生產中,用各種富含纖維素和木質素的木屑、棉籽殼、甘蔗渣、稻草、麥稈等作為原料,加入一定量的輔助營養物質和水,便可製成木屑或棉籽殼等培養基,這些培養基也稱為固體培養基。

(2)根據營養物質分類

依據營養物質的**,可以把靈芝培養基分為天然培養基、半合成培養基和合成培養基。

①天然培養基是指用天然有機物配製而成的培養基。如小麥、大豆、玉米、麩皮、米糠、馬鈴薯、秸稈、木屑、棉籽殼、甘蔗渣等農林副產品及其下腳料,以及植物組織的浸出液,如馬鈴薯汁、麥芽汁、豆芽汁等都可以用來配製天然培養基。這種培養基含有豐富的營養物質,**廣泛、成本低,適合於靈芝菌種分離、培養、保藏及大規模生產用。

這些天然有機物化學成分比較複雜,即使是同一種物質,因產地、採收季節、提取方法和品種的不同,其營養組成和含量也不盡相同,不宜作為靈芝生理研究的培養基。

常用的天然培養基,如馬鈴薯瓊脂培養基、木屑麩皮(或米糠)培養基和堆肥培養基等。

②半合成培養基是用成分未知的天然物質和成分已知的物質配成。如pda培養基中的馬鈴薯是未知成分的天然物質,而葡萄糖是已知化學成分的物質。馬鈴薯的成分因品種、成熟度和施肥栽培條件不同,每次用其配成的培養基不可能是相同的。

因此,在天然培養基中新增適量的無機鹽,或在合成培養基中新增某些天然有機物配製而成的培養基,都稱半合成培養基,是靈芝菌種生產和栽培中常用的培養基。

③合成培養基是指採用化學成分和濃度已知的有機化合物,包括碳水化合物。含氮化合物、有機酸類、無機鹽及生長素配製而成的培養基。這類培養基組成和含量明確,一般用於靈芝的有關營養、代謝等生理生化研究,以及菌種的純培養和菌種保藏。

靈芝母種培養基中的瓊脂有哪些理化性狀?

靈芝母種培養基有哪些?

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(1)馬鈴薯半合成培養基

①馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂培養基(簡稱pda培養基)。馬鈴薯(去皮)200克,瓊脂18~20克,葡萄糖20克,水1000毫升。也可以用蔗糖20克取代葡萄糖即為psa培養基。

還可以新增磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,維生素b11毫克。適用於靈芝的分離、培養、保藏。

②馬鈴薯、麥芽糖、瓊脂培養基。馬鈴薯(去皮)300克,麥芽糖10克,瓊脂18~20克,水1000毫升。

(2)玉米粉半合成培養基

玉米粉、蔗糖培養基:玉米粉40克,蔗糖10克,瓊脂18~20克,水1000毫升。或者在培養基中新增蛋白腖2克或酵母膏10克。適用於保藏菌種。

(3)麥麩培養基

麥麩150克,硫酸鎂0.5克,磷酸二氫鉀1.5克,葡萄糖20克,瓊脂18克,水1000毫升。適合於靈芝的菌種分離和培養。

(4)酵母浸膏半合成培養基

①酵母浸膏葡萄糖瓊脂培養基。酵母浸膏2克,葡萄糖20克,瓊脂20克,水1000毫升。

②麥芽糖酵母膏培養基。酵母浸膏5克,麥芽糖15克,磷酸二氫鉀1.5克,硫酸鎂0.5克,瓊脂20克,水1000毫升。

以上適用於菌種的分離、保藏。

(5)麥芽膏半合成培養基

①麥芽膏瓊脂培養基(ma)。麥芽膏20克,瓊脂20克,水1000毫升。

②麥芽膏葡萄糖瓊脂培養基(mdda)。麥芽膏20克,葡萄糖20克,蛋白腖1克,瓊脂20克,水1000毫升。

適合菌種的分離、保藏。

(6)麥芽浸膏綜合培養基

①麥芽浸膏10克,磷酸銨1克,硫酸鐵0.1克,硝酸銨1克,硫酸鎂0.1克,硫酸錳0.05克,瓊脂20克,水1000毫升。

②麥芽浸膏10克,蛋白腖1克,酵母浸膏0.5克,麥芽糖5克,硫酸鎂0.5克,磷酸二氫鉀0.25克,硝酸鈣0.5克,瓊脂20克,水1000毫升。

以上培養基適合於靈芝菌種的培養。

(7)標準培養基

①真菌標準瓊脂培養基。馬鈴薯澱粉2克,硫酸鎂0.75克,磷酸二氫鉀1.25克,葡萄糖10克,天門冬酸胺2克,瓊脂15克,水1000毫升。

適用於培養觀察靈芝菌絲形態。

②標準葡萄糖瓊脂培養基。葡萄糖15克,瓊脂18克,水1000毫升。適用於靈芝分離和純化。

③完全培養基。硫酸鎂0.5克,蛋白腖2克,磷酸二氫鉀0.46克,葡萄糖20克,磷酸氫二鉀1克,維生素b150毫克,瓊脂20克,水1000毫升。適合靈芝的生理、生化研究。

(8)察氏瓊脂培養基

蔗糖30克,硝酸鈉3克,硫酸鎂0.5克,氯化鉀0.5克,硫酸亞鐵0.01克,磷酸二氯鉀1克,瓊脂15克,水1000毫升。適合靈芝的生理、生化研究。

(9)天門冬氨酸礦鹽培養基

天門冬氨酸4克,硫酸鎂2克,氯化鈣0.1克,磷酸二氫鉀4克,磷酸銨2克,碳酸鈣0.25克,瓊脂15克,水1000毫升。

培養靈芝常用的合成培養基,有緩衝作用,適於保藏靈芝菌種。

如何配製靈芝原種和栽培種培養基?

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原種和栽培種培養

基的配方基本相同,製作方法也相似。為避免重複,下面簡介幾種常見的培養基配方及製法。

(1)木屑培養基適宜於靈芝菌種

闊葉樹木屑78%,蔗糖1%,麩皮(或米糠)20%,石膏粉1%(或碳酸鈣1%)。或加一定比例的尿素、碳酸鈣、磷酸二氫鉀。

闊葉樹木屑78%,玉米粉20%,石膏粉1%,尿素1%。

闊葉樹木屑66%,麩皮或米糠30%,蔗糖1%,石膏粉1%,黃豆粉1.5%,硫酸鎂0.5%。

闊葉樹木屑74%,麩皮25%,蔗糖0.8%,硫酸銨0.2%。

闊葉樹木屑40%,棉籽殼38%,麩皮15%,玉米粉3%,豆餅粉2%,蔗糖1%,石膏1%。

製法:按配方稱取原料,先將糖等輔料溶於水,其他原料混合攪拌,再加入糖水攪拌均勻,使料含水量達60%~65%。

(2)穀粒培養基適用於生產靈芝菌種

以小麥、大麥、燕麥、高粱、小米、裸麥、豆米渣等為主料製作培養基,統稱穀粒培養基。

小麥(或燕麥、高粱、稻穀粒)98%,碳酸鈣2%,也可用2%石膏替代碳酸鈣。

玉米粒100%,另加0.2%多菌靈(用於浸泡玉米粒)。

小麥90%,石膏粉2%(或碳酸鈣2%),木屑8%。

玉米粒70%,闊葉樹木屑25%,麩皮4.4%,石膏粉0.6%。

稻穀粒50%,棉籽殼40%,麩皮8%,石膏粉2%。

製法:選用無病蟲害的小麥粒(大麥、燕麥、稻穀、玉米等),用清水浸泡8~12小時,玉米粒需用0.2%多菌靈液浸泡8~12小時,稍濾幹,加石膏粉或碳酸鈣等輔料,調至含水量60%~65%,ph7即可。

(3)棉籽殼培養基是生產用培養基

以棉籽殼為主料製作培養基。

棉籽殼98%,蔗糖1%,石膏粉1%。

棉籽殼78%,麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%。

棉籽殼68%,木屑10%,麩皮18%,玉米粉2%,石膏粉1%,蔗糖1%。

製法:按配方稱取主料和輔料,先將棉籽殼加適量水拌勻,堆悶3~4小時,使其吸水,然後和輔料混勻,含水量60%~65%,ph6~7。

(4)蔗糖渣培養基適用於一般靈芝

甘蔗渣78%,麩皮(或米糠)20%,石膏粉1%,過磷酸鈣1%(或碳酸鈣1%),含水量65%。或甘蔗渣60%,闊葉樹木屑25%,麩皮(或玉米粉)15%,含水量65%。製法:

按配方稱料,先將甘蔗渣加適量水拌勻,堆悶3~4小時,然後加輔料,攪拌均勻。

(5)玉米芯培養基適用於靈芝代料生產

玉米芯78%,麩皮或米糠20%,石膏1%,蔗糖1%,含水量65%。或玉米芯55%,闊葉樹木屑25%,麩皮18%,石膏1%,蔗糖1%,含水量65%。製法:

將玉米芯粉碎成黃豆粒大小的顆粒,置ph10~11的石灰水中浸泡10~12小時,撈出,用水沖洗達中性,瀝至不滴水後,加輔料攪拌均勻,控制含水量至60%~70%。

(6)木塊培養基

木塊(或樹枝)77%,木屑14%,麩皮(或米糠)7.7%,蔗糖0.8%,石膏粉0.

5%。製法:將木塊用1%蔗糖水浸泡12小時,再與其他輔料混合,含水量60%~65%。

適用於靈芝進行段木栽培時制種用。

原種和栽培種培養基的分裝滅菌:常用容器為750毫升玻璃瓶,栽培種也可用無毒的聚丙烯或聚乙烯塑料袋。

機械分裝:選用送料筒口徑與容器口徑相當的裝袋(瓶)機,啟動開關,將料送入料斗,容器即可接裝配料。

手工分裝:分裝木屑培養基時,手握瓶頸,瓶底放在木屑料堆上進行裝料,另一手往瓶中裝入培養基,使培養基的鬆緊度上下均勻,一直裝到瓶肩,用「┸」形或「ㄥ」形工具壓平。培養基的鬆緊度要以下部稍鬆、上部稍實為好。

培養基裝完後用一根尖頭木棒在培養基**鑽一個直徑為1.5~2釐米通達瓶底的洞,裝瓶結束後,把瓶子內外洗淨、擦乾。麥粒培養基裝入瓶中,上方只需稍加壓平。

木塊培養基裝瓶時,在表面應再蓋一薄層木屑培養基。

除此之外,生產性栽培袋的裝料應注意在配料前,木屑必須過篩,揀掉尖利的木片和雜物,以免刺破塑料袋。裝袋前,檢查塑料袋有無破洞,封口是否牢固;裝袋時,邊加培養基,邊用手壓實,裝至塑料袋長度的3/5,把培養基上方表面壓平;裝袋結束後,用布擦去沾在袋內外的培養基;兩頭紮緊,或取硬質塑料套環,套進袋口上端部分,代替瓶頸。滅菌後即可接種。

食用菌母種培養基操作步驟需要注意什麼

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