請問分子生物學專家問題RNA聚合酶二的轉錄因子它們的結合順序是怎樣用實驗的方法證明的

時間 2021-09-06 19:11:47

1樓:

3.2 酵母rna聚合酶及轉錄複合物結構的描述

3.2.1 調節器的發現

包含純化的rna聚合酶ii,5個通用轉錄因子tfiib,e,f,h和tata結合蛋白的體系只能維持基礎轉錄,而對於基因特異性啟用蛋白的轉錄則無能為力。對這一問題的研究導致了調節器的發現,並使真核轉錄的一些早期遺傳資料得到很好的解釋。調節器是由大約20個不同蛋白組成的多蛋白複合體[17-19],在從酵母到人類的所有真核生物中,調節器的作用是將正負訊號從與dna結合的特異基因轉錄因子傳遞給rna聚合酶ii及其通用轉錄因子(圖2),其中圖2物質包含dna、通用轉錄因子tbp,tfiib,e,f和h、調節器、rna聚合酶以及與增強子結合的特異性轉錄因子。

在探索轉錄過程研究中調節器的發現是一個里程碑。

隨著調節器被分離,真核基因調節和轉錄的基本組分已被建立,即通用轉錄因子、調節器和rna聚合酶ii。細菌中的轉錄抑制和啟用是其直接與rna聚合酶結合,從而影響與啟動子的結合。真核中染色質和調節器在基因特異性轉錄因子與rna聚合酶之間起作用,使得調節更加複雜化。

asturias等在2023年[20]得到了rna聚合酶ii-調節器複合物的電鏡圖,此圖顯示調節器圍繞聚合酶成月牙形。調節器包含大約20多肽,1mda。近來有關功能的調節器頭部分子的表達和純化已有報道。

此複合物只有7個亞基,分子量為223kda[21]。調節器頭部分子與rna聚合酶的相互作用需要通用轉錄因子tfiif的參與。

3.2.2 酵母rna聚合酶及轉錄複合物結構描述

早在10年前,x-射線結晶學已描述了tbp結合於tata-box dna,以及tfiib,tbp和dna三重複合物的結構[22-25]。kornberg則首先意識到所有真核轉錄元件的組裝可能是以rna聚合酶作為一個平臺,但是酵母rna聚合酶ii的複雜性以及純化複合物的少量和不穩定性成為晶體研究的瓶頸。kornberg用電鏡和x-射線結晶學相結合,依據自己20年來對蛋白表達純化的研究經驗和二維蛋白結晶的方法最終解決了這個問題[26]。

2樓:匿名使用者

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