膜片鉗實驗原理是什麼?膜片鉗的原理簡述

時間 2023-05-26 13:15:03

1樓:匿名使用者

膜片鉗技術對膜電壓的鉗制是通過負反饋迴路而實現的,這種負反饋電路要求細胞膜電位在所有時間都與放大器輸出的指令電壓相等。當由於離子通道的開放造成膜電位與指令電位之間發生差異時,微電極放大器就通過記錄電極向胞內自動注入大小相等和方向相反的電流而使膜電位得以鉗制。通過記錄放大器用以維持細胞膜鉗制電位所輸出的電流大小,即可推算出由於離子通道開放所產生的電流的大小,以及由此導致的膜電導的改變。

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膜片鉗的原理簡述

2樓:遊客隨風

又稱單通道電流記錄技術,用特製的玻璃微吸管吸附於細胞表面,使之形成10~100的密封(giga-seal),又稱巨阻封接,被孤立的小膜片面積為μm量級,內中僅有少數離子通道。然後對該膜片實行電壓鉗位,可測量單個離子通道開放產生的pa(10的負12次方安培)量級的電流,這種通道開放是一種隨機過程。通過觀測單個通道開放和關閉的電流變化,可直接得到各種離子通道開放的電流幅值分佈、開放幾率、開放壽命分佈等功能參量,並分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關係。

還可把吸管吸附的膜片從細胞膜上分離出來,以膜的外側向外或膜的內側向外等方式進行實驗研究。這種技術對小細胞的電壓鉗位、改變膜內外溶液成分以及施加藥物都很方便。

膜片鉗技術的技術原理

3樓:匿名使用者

膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由於電極尖端與細胞膜的高阻封接,在電極尖端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離,因此,此片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管,用一個極為敏感的電流監視器(膜片鉗放大器)測量此電流強度,就代表單一離子通道電流。

膜片鉗技術的建立,對生物學科學特別是神經科學是一具有重大意義的變革。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的(或多個)的離子通道分子活動的技術。此技術的出現自然將細胞水平和分子水平的生理學研究聯絡在一起,同時又將神經科學的不同分野必然地融匯在一起,改變了既往各個分野互不聯絡、互不滲透,阻礙人們全面認識能力的弊端。

4樓:玄星海悟三

膜片鉗是一種可以直接觀察單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易程度等特性的一種實驗技術。其基本原理是用一個尖端光潔,直徑約為。

的玻璃微電極同神經或肌細胞的膜接觸而不刺入,然後在微電極另一端開口處施加適當的負壓,將與電極尖端接觸的那一小片膜輕度吸入電極尖端的纖細開口,這樣在這一小片膜周邊與微電極開口處的玻璃邊沿之間,會形成緊密的封接,其電阻可達數個或數十個千兆歐,這實際上把吸附在微電極尖端開口處的那一片膜同其餘部分的膜在化學上完全隔離出來,由微電極記錄到的電流變化只同該膜片中通道分子的功能狀態有關。如果在這一小片膜中只包含了一個或少數幾個通道蛋白分子,那麼通過微電極測量出的電流,就是某種帶電離子經由開放的單一通道蛋白質分子進行跨膜移動的結果。

應用:直接觀察神經細胞,肌細胞,及其他各種細胞中的單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易等特性,由於這時微電極不刺入細胞,即使用於纖小的細胞也不致造成損傷。膜片鉗實驗技術及其各種變式,是從分子水平研究跨膜離子移動和其他功能的重要手段。

膜片鉗技術的簡介

5樓:回※憶

膜片鉗技術 是用微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)接觸細胞膜,以千兆歐姆以上的阻抗使之封接,使與電極尖開口處相接的細胞膜的小區域(膜片)與其周圍在電學上分隔,在此基礎上固定點位,對此膜片上的離子通道的離子電流(pa級)進行監測記錄的方法。

用場效電晶體運算放大器構成的i-v轉換器是測量回路的核心部分。在場效電晶體運算放大器的正負輸入端子為等電位,向正輸入端子施加指令電位時,由於短路負端子以及膜片都可等電位地達到鉗制的目的,當膜片微電極尖端與默片之間形成10gω以上封接時,其間的分流電流達到最小,橫跨膜片的電流可100%作為來自膜片電極的記錄電流(lp)而被測量出來。

這一偉大的貢獻,使neher和sakmann獲得2023年度的諾貝爾生理學與醫學獎。

膜片鉗技術的膜片鉗法的各種模式

6樓:九夏侯柳

圖1是表示膜片鉗法各種模式的模式圖,首先建立的單通道記錄是細胞吸附式,其後又建立了膜內面向外和膜外面向內的模式。最近,又分別建立了開放的細胞吸附式膜內面向外和穿孔囊泡膜外面向外的模式。全細胞記錄法是指在常規的方法的基礎上,附加穿孔膜片的模式。

在細胞吸附模式上將膜打穿成孔,記錄膜片以外部位的全細胞膜的離子電流,這時全細胞模式。

什麼是全細胞膜片鉗實驗

膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1 3個離子通道 面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由於電極尖端與細胞膜的高阻封接,在電極尖端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離,因此,此片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管,用一個極為敏感的電流監視器 膜片鉗放大器 測量此電流強度,該電流強...

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