誰能告訴我結晶紫染色法測定生物膜的詳細步驟？
1樓：匿名使用者
1．在96孔細胞培養板各孔中加含5×104～10×4 wehi-164細胞的培養液（含10％小牛血清的好簡rpmi-1640培養液），37℃ 5％ co2的二氧化碳培養箱中培養2～3小時，讓細胞帖壁。
2．用rpmi-1640培養液10倍遞次稀釋tnf標準品，根據需要3～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加稀釋的標準品或待檢樣品，每個稀釋度3個重複孔。對照孔6個，3個陽性對照孔各加含4μg tnf的rpmi-1640培養液，3個陰性對照。
孔各加100μl rpmi-1640培養液。繼續培養18～24小時。
3．甩去培養液，用pbs小心洗滌一次，每孔加 10％甲醇。
溶液固定細胞30秒鐘。
4．吸去甲醇溶液，每孔加結晶紫。
染液，室溫中放置20分鐘。
5．輕輕甩去染色液，用蒸餾水。
洗滌各孔，將培養板倒置於吸水紙上吸乾水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期儲存。
6．測友陪褲定前，每孔加 33％醋酸。
脫色，充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度（od）值對樣品稀亂扒釋度作圖，比較標準品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子。活性。
2樓：匿名使用者
你好，我也想測細菌生物膜，請問您還有步驟嗎，謝謝您。
3樓：
我也在做困培這個 和你遇州尺稿到的情況一樣 該怎麼辦呢 想尋求您的幫助 再就是您用的結晶紫濃度冊孝是多大的 脫色是用的乙醇嗎？
細菌生物膜構造和檢測是否形成。的試驗過程和檢測方法，包括染色，觀察等。詳細點，謝謝各位大大了。
4樓：
生物膜？我們實驗室是做這個的……biofilm
寶你是誰啊？
嗯，觀察生物膜形成情況可用比色杯或者elisa板兒養菌液，24~72小時，分組，養到時見後小心吸走液體，膜就留在杯裡了，此時用結晶紫染色，可看到膜形成與否以及厚度。
5樓：mr貓貓肥死
可以用格蘭仕染色法。雖然這個是用於檢測陽性菌與陰性菌的，但這樣也可以檢測膜形成。具體可以問。
有人用結晶紫染色法測定細胞增殖活性的嗎
6樓：匿名使用者
因為，結晶紫染色是不會區分出細胞核和細胞質的。蘇木精染細胞核成紫色，易紅染細胞質成粉色。這些是原理。
細胞形態不清晰原因：沒固定好，細胞破碎。改4%的中性多聚甲醛試試。
2,染色時間長，改為，沒清洗乾淨，多洗幾遍，4,最重要的：結晶紫染色本身就不清晰，就是為了計算細胞數目，方便才這樣。要是為了觀察結構，就不要用結晶紫了。
結晶紫染色法怎麼區分死細胞和活細胞？
7樓：禮品
死細胞由於細胞膜選擇通透性喪失，結晶紫可進入細胞質內而呈現紫色；而活細胞不會被染色，進而區分細胞的死活。
8樓：杜靜梅
活細胞因為細胞膜有選擇透過性，不會被染色，死細胞細胞膜變得全透，因此會被染色。
結晶紫染色的原理是什麼？是因為活細胞與死細胞的細胞膜通透性不一致嗎？
9樓：大木人
結晶紫是鹼性染料，可以與細胞核中的核酸結合把核染成藍色。
結晶紫是小分子物質，無論活細胞還是死細胞都可以染色，但要染活細胞必須控制濃度。
10樓：
結晶紫染色是分析染色體的。
用高氯酸滴定液，加結晶紫指示劑測定氨基酸的含量的具體步驟可以告訴我嗎，謝謝
11樓：網友
如果是最基本的氨基酸，稱取1g氨基酸，直接用1ml甲酸溶解氨基酸，加入2滴結晶狀指示劑，滴定至變色為止，忘記具體是變什麼顏色了，還是3年前在之前乙個單位（吉爾生化，不知道你曉得不？應該做保護氨基酸和多肽比較有名的一家）做氨基酸原料檢測時做的。注意管和三角瓶要無水。
當時最討厭做這個，甲酸味道太大了。
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