為什麼使用對數生長期的大腸桿菌odm不超過0 4

時間 2025-07-19 22:25:18

1樓:網友

如果使用調整期的細胞,細胞數量太少,不合適。

如果使用平臺期的細胞棗物,這個時候細胞內開始表達次級代謝產物了,細胞和細胞之間形態的特徵也很不一樣頃伏,做出來的細胞雖然數量多,但是感受態效率低。

如果使用衰亡期的細胞,都是細胞碎雀巖攜片和死細胞,沒法兒用。

對數期細胞此時形態間差異性不大,細胞也健康,數量也不少。

綜上所述,用對數期做。

2樓:網友

為什麼使用對數生長期的大腸杆灶野汪菌odm不超過?:

因為他脊手們的統隱仔計以及內容計劃,不是先規劃好,然後進行模式切換式,這樣也能更好的規整計劃。

大腸桿菌感受態細胞的製備實驗中a600為什麼在0.4到0.5之間

3樓:匡雅霜

你是用37℃搖菌的吧。

在這個溫度下,od=左右,是大腸桿菌剛進入對數期,這個時候的大腸桿菌菌體狀態穩定,用來製作感受態,效率會比較高。

您好,請問您做微生物實驗時,培養到對數生長期的菌體的od 600是在大概多少的數值範圍?

4樓:網友

od600能檢測出的時候已經是10^6到10^7 cfu/ml了。od600最高值時,一般10^9 cfu/ml。

od的檢測範圍很窄。

5樓:食品安全保健及基因

之間,一般在的時候新增誘導劑,這個是針對大腸桿菌的,不同菌不一樣。

大腸桿菌感受態製備過程中od值高於0.6會有什麼影響,為什麼??

6樓:匡雅霜

這個要看你是用多高的溫度來搖菌的了。

如果你用的是37℃搖的話,那麼這個od有點老了,這樣做出來的感受態轉化效率會低些,但是隻是轉質粒的話還是沒問題的。

7樓:大魚小心

這是乙個經驗值,時大腸桿菌處於對數期,對數期的細胞穩定用於科研優勢多,過了細菌有點」老「了,有害代謝物也開始積累。

進行病原獨立測定時,為什麼要使用對數生長期的細菌培養物?

8樓:網友

在這個時期,細菌的生長狀態,制病性,感染強度,傳染力,都是最佳的狀態,是最適合研究的時期。

求助大腸桿菌感受態細胞問題

9樓:網友

(1)質粒dna的質量和濃度: 用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的,轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比,但當加入的外源dna的量過多或體積過大時,則會使轉化率下降。一般地,dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5%,1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。

對於以質粒為載體的重組分子而言,分子量大的轉化效率低,實驗證明,大於30kb的重組質粒將很難進行轉化。此外,重組dna分子的構型與轉化效率也密切相關,環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高10~100倍,因此重組dna大都構成環狀雙螺旋分子。 (2)感受態細胞的質量:

所用的cacl2等試劑均需是最高純度的,並用最純淨的水配製,最好分裝儲存於4℃ (3)細胞的生長狀態和密度 最好從-70℃或-20℃甘油儲存的菌種中直接轉接用於製備感受態細胞的菌液。不要用已經過多次轉接,及貯存在4℃的培養菌液。細胞生長密度以每毫公升培養液中的細胞數在5×107個左右為佳。

即應用對數期或對數生長前期的細菌,可通過測定培養液的od600控制。對tg1菌株,od600為0.5時,細胞密度在5×107個/ml左右。(應注意od600值與細胞數之間的關係隨菌株的不同而不同)。

密度過高或不足均會使轉化率下降。 (二)感受態細胞轉化中的影響: 整個操作過程均應在無菌條件下進行,所用器皿,如離心管,移液槍頭等最好是新的,並經高壓滅菌處理。

所有的試劑都要滅菌,且注意防止被其它試劑、dna酶或雜dna所汙染,否則均會影響轉化效率或雜dna的轉入。整個操作均需在冰上進行,不能離開冰浴,否則細胞轉化率將會降低。

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