1樓:伍瑤釋胭
首先確定你所要篩選的目的微生物,並設計好「篩子」。以纖維素酶。
產生菌的篩選為例。
先找可能存在此類微生物的環境,如森林裡的枯枝爛葉和腐質土。採好樣品,拿回實驗室,首先進行擴大培養。就是把樣品中所有的微生物都培養增殖。一般就用全營養培養基。
培養液稀釋不同倍數後,做平板單細胞培養,這時就要用到「篩子」了。對於纖維素酶產生菌,篩子可選用可溶性纖維素。平板培養時,用可溶性纖維素作唯一碳源。
不產生纖維素酶的微生物就不能生長(或生長極弱),把生長良好的微生物挑選出來,再進行擴大培養,再用纖維素唯一碳源的培養基進行篩選,並挑選生長優勢菌落,重複以上步驟(可以多挑選幾支進行對比選擇)。幾次以後,用纖維素粉(不溶性的)做唯一碳源的培養基,進行平板培養,纖維素酶產生量越大、活性越高,產生的透明圈直徑就越大。用這種辦法可能對酶產生量大、活性高的菌種做進一步篩選。
其它目的微生物的篩選步驟也差不多。
關鍵是取樣地點的選擇和「篩子」的設計。
希望對你有用。
2樓:令運旺冉培
配製篩選培養基,篩選培養基的配製根據你所要分離的酶。
通過在選擇培養基上的長勢,初步獲得所需微生物。
對獲得的微生物進行進一步篩選。
可以通過生理生化反應,液相色譜等獲得所需微生物。
設計乙個從環境中分離篩選纖維素酶高產菌株的實驗方案,
3樓:惠企百科
正確的實驗設計一般是:土壤取樣→選擇培養(此步是否需要,應根據樣品中的菌株數量的多少來確定)→梯度稀釋→將菌懸液塗布到有特定選擇作用的培養基。
上→挑選菌落→發酵培養。
微生物喚液租在固體培養基上生長形成的單個菌落,通常是由乙個細胞繁殖而成的集合體。因此可通過挑取單菌落而獲得一種純培養。獲取單個菌落的方法可通過稀釋塗布平板或平板劃線等技術完成。
值得指出的是,從微生物群體中經分離生長在平板上的單個菌落並不一定保證是純培養。
因此,純培養的確定除觀察其菌落特徵外,還要結合顯微鏡檢測個體形態特徵後才能確定,有些微生物的純培養要經過一系列分離與純化過程和多種特徵鑑定才能得到。
土壤是微生物生活的大本營,它所含微生物無論是數量還是種類都是極其豐富的。因此土壤是微生物多樣性的重要場所,是發掘微生物資源的重要基地,可以從中分離、純化得到和兆許多有價值的菌株。
分離篩選微生物菌種的基本程式
4樓:天羅網
流程。 優良糖化酶菌株的分離與篩選。
融化培養基→倒平板→打散孢子團粒→梯度稀釋→塗布平板→培養觀察→滴加碘液→挑菌落→接種→培養→糖化酶活力測定→菌種儲存。
酸乳製品中的乳酸菌的分離。
制培養基→倒平板→梯度稀釋→塗布平板→培養觀察→挑菌落→接牛乳管→培養觀察→傳代培養→挑選凝乳管→乳酸測定→菌種儲存。
5 步驟。 優良糖化酶菌株的分離與篩選。
1)融化澱粉察氏培養基,稍冷後倒平板與斜面數個。
2)取種曲少許,加入10ml帶玻璃球的無菌生理鹽水的三角瓶中,用力振盪打散孢子團粒,使之形成均勻的孢子懸浮粒。然後將其用無菌紗布過濾於無菌試管中。
3)將上述濾液以10倍稀釋法知釋至10-7,取後3個稀釋度的稀釋液各,於澱粉察氏培養基平板上用無菌塗布器分別依次塗布2至3個皿,30℃培養1~2d.
5)效能測定:測定各菌落的糖化酶活力。
酸乳製品中的乳酸菌的分離。
1)製備bcg牛乳營養瓊脂培養基。
稱取脫脂奶粉10g,溶於50ml水中,加入溴甲酚綠酒精溶液,壓力下滅菌20min.
另取瓊脂2g,溶於50ml水中,加酵母膏1g,溶解後調ph值至,壓力下滅菌20min.
趁熱將上述兩液以無菌操作混合均勻,倒平板6個,待凝固後,置37℃培養24h,若無雜菌生長,即可使用。
2)將樣品以10倍稀釋法稀釋至10-7,取其中-6 2個稀釋度的稀釋液各,分別置於上述各營養平板上,用無菌塗布器依次塗布2至3個皿,置43℃培養48h,如出現圓形稍扁平的黃色菌落及其周圍培養基亦為黃色者初步定為乳酸菌。
3)將典型菌落轉至脫脂乳發酵管,43℃培養8~24h,若牛乳管凝固,無氣泡,呈酸性,鏡檢細胞桿狀或鏈球狀,革蘭氏染色呈陽性,則將其連續傳代若干次,43℃培養,挑選出在3~4h能凝固的乳管,儲存備用。
4)乳酸菌的鑑定及生物量的測定。
分離純化微生物的方法有哪些?各方法適用分離什麼菌種
5樓:槐樹的戀愛
主要有1、稀釋倒平板法。
首先把微生物懸液作一系列的稀釋(如:
10000),然後分別取不同稀釋液少許,與已熔化並冷卻至50℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻後,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固後製成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養一定時間即可出現菌落。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由乙個細菌細胞繁殖形成的。
隨後挑取該單個菌落,或重複以上運算元次,便可得到純培養。
2.、稀釋塗布平板法。
將已熔化的培養基倒入無菌平皿,製成無菌平板,冷卻凝固後,將一定量的微生物懸液滴加在平板表面,再用無菌玻璃塗棒將菌液均勻分散至整個平板表面,經培養後挑取單個菌落。
3、平板劃線法。
將微生物樣品在固體培養基表面多次作「由點到線」稀釋而達到分離。
4、稀釋搖管法。
先將一系列盛無菌瓊脂培養基的試管加熱使瓊脂熔化後冷卻並保持在50℃左右,將待分離的材料用這些試管進行梯度稀釋,試管迅速搖動均勻,冷凝後,在瓊脂柱表面傾倒一層滅菌液體石蠟和固體石蠟的混合物,將培養基和空氣隔開。
6樓:p**en武
分離純化微生物的方法有很多。比如說培養基培養法。
7樓:網友
主要有1.劃線法2.倒平板法3.
塗布法 根據分離的菌種選擇不同的培養基 稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法。
8樓:網友
一般採用孢子分離的方法。一般的菌種都可以適用。
9樓:網友
在平板上劃線或塗布即可。
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