標準蛋白質樣品能否用考馬斯亮藍法測定?為什麼?

時間 2025-04-24 07:47:14

1樓:糜溫牽淑

公式是根據測量結果自己算出來的:

考馬斯亮藍比色法是由bradford等人建立。

的1種測定微量蛋白質的方法l5],考馬斯亮藍所含疏。

水基團在酸性條件下與蛋白質的疏水微區具有親和力,通過疏水作用與蛋白質相結合,形成的藍色蛋白質一染料複合物,在595

nm處有最大吸光度,複合鬥態物1

h內保持穩定。在一定的蛋白質濃度範圍內,蛋白質一染料複合物在595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比,因此可用於蛋白質含量的測定。

測定時,用同一種標準蛋白(自己選,如牛血清白蛋白,所選的標準蛋白最好是純化的待測蛋白——但這是理想狀態,一般選擇氨基酸構成與待測蛋白相近的標準蛋白。否則將影響測念改定結果)配製成覆蓋待測樣品蛋白濃度的標準蛋白溶空高源液,然後加等量考馬斯亮藍g-250,混勻後用紫外分光光度計測定個標準蛋白樣品的吸光值。並測定待測樣品(可稀釋成幾個不同濃度的樣品同時測)的吸光值。

所有樣品重複測三次。

最後以蛋白標準溶液濃度為橫座標,以吸光度為縱座標,繪製標準曲線。計算出迴歸方程。如y=ax+b

讓後把待測樣品的吸光值代入迴歸方程,算出待測樣品濃度。

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2樓:泉來福永棋

考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度,是利用蛋白質-染料結合的原理,定量的鄭鬥測定微量蛋白濃度的快速、靈敏的方法。

考馬斯亮藍g-250存在著兩種不同的顏色形式,紅色和藍色。考馬斯亮藍g-250在酸性遊離狀態下呈棕紅色,最大光吸收在465nm,當它與蛋白質結合後變為藍色,最大光吸收在595nm。

在一定的蛋白質濃度範圍內,蛋白質-染料複合物在波長為595nm處的光吸收與蛋白質含量成正正叢旁比,通過測定595nm處光吸收的舉橡增加量可知與其結合蛋白質的量。

考馬斯亮藍法測定樣品蛋白質含量(ug/ml)=m×n÷v計算

3樓:

摘要。您好這邊為您查詢到,u代表單位,l代表,體積公升,u/l代表的意思是每公升藥品中含有多少單位藥物。1ug/ml=0.01u/ml。

g/ml是濃度的單位,μg是"微克",1μg=0.001 1000毫公升=1000立方厘公尺 1000毫公升=1立方分公尺。1毫公升=1西西(cc)。

考馬斯亮藍法測定樣品蛋白質含量(ug/ml)=m×n÷v計算。

幫我計算一下這個題。

您好這邊為您查詢到,u代表單位,l代表,體積公升,u/l代表的意思是每公升藥品中含有多少單位藥物。1ug/ml=0.01u/ml。μg/ml是濃度的單位,μg是"微克",1μg=0.001 1000毫公升=1000立方厘公尺 1000毫公升=1立方分公尺。

1毫公升=1西西(cc)。

解答:因1毫克(㎎)=1000微克(ug);所以1微克(ug)=毫克(mg);又因為1公升(l)=1000毫公升(ml);所以1毫公升(ml)=公升(l)。所以1ug/ml=。

說明】①質量單位換算關係:1千克(kg)=1000克(g);1克(g)=1000毫克(mg);1毫克(mg)=1000微克(ug);②體積單位換算關係是】1公升(l)=1000毫公升(ml);1立方公尺(m³)=1000公升(l)。

我需要這個題的詳細步驟。

我需要這個題的詳細步驟。

已經算出考馬斯亮藍測定出來蛋白質的濃度了,怎麼算含量(%)

4樓:

計算含量(%)的公式檔悄陸為:蛋白質濃度(μg/ml)×取樣體積(ml)×絕對分子行頃質量/稀釋因子(ml)×100%。即:

含量(%)蛋白質濃度(μg/ml)×取樣體積(ml)×絕對分子質量/稀釋因子(ml)×100%其中,絕對分子質量是蛋白質的分子量,一般情況下,1克的蛋白質的絕對分子量為1,000,000微克,因此,蛋白質的絕對分子質量計算運陸為:蛋白質質量(克)×1,000,000微克。稀釋因子是用來表示樣品的稀釋倍數,一般情況下,可以認為稀釋因子等於取樣體積。

因此,計算出蛋白質含量(%)的公式為:蛋白質濃度(μg/ml)×取樣體積(ml)×蛋白質質量(克)×1,000,000微克/取樣體積(ml)×100%。

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